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產品名稱:

Hs578T人乳腺癌細胞

產品型號: 產品時間: 2024-07-28
Hs578T人乳腺癌細胞
該細胞公司*,培養狀態下的,現貨一周供應,我公司可100%保障該細胞的質量,代數年輕活性好,不含有細菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體 。

產品概述

Hs578T人乳腺癌細胞

【細胞生長】:貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長

【細胞傳代】:1:3 傳代

【細胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

【細胞檢測】:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

【細胞凍存】:液氮凍存(基礎培養基+10%DMSO+20%FBS)

【細胞運輸】:干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks)

【細胞用途】:人乳腺管癌細胞價格只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

關于細胞培養溫馨小貼士
細胞的凍存方法
1.細胞:選對數生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。

2.計數:按常規方法把細胞制成細胞懸液,計數,令細胞密度達5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。

3.凍存液:先用培養液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。

4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。

5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。


 培養基生產和使用常見問題
1.低血清培養基能用肉眼判斷其pH值嗎?
   答:低血清培養基中酚紅的含量與普通培養基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。
2.低血清培養基的緩沖系統是什么?
   答:平衡鹽一般是由無機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統、Earle′s系統、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統等。199系列培養基、MEM系列培養基均有Hanks′系統的培養基及Earle′s系統的培養基。但是有些培養基均不是以上常規的平衡鹽系統,例如RPMI 1640培養基、F12培養基。MEM(SLM)低血清培養基的平衡鹽系統也不是常規的平衡鹽系統,該平衡鹽系統的緩沖能力強于常規平衡鹽系統的緩沖能力。
3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么?
   答:以0.2mol/L的 L-谷氨酰胺配制為例:稱取L-谷氨酰胺2.92g,加注射用水100ml,充分攪拌混勻。用0.2μm濾膜正壓過濾除菌。溶液應在4℃下避光保存,2周內使用。以7.5% NaHCO3的配制為例:稱取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過濾除菌。
4.什么培養基中可以省去加酚紅?
   答:酚紅在培養基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質量并不會產生影響,可以通過純化技術去除,但酚紅在無血清培養基可能帶來胞內鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產企業在生產過程中都使用無酚紅培養基。
5.放置在冰箱中的培養基顏色會發生變化,為什么?
 
     答:培養基保存于4℃冰箱中,培養基內CO2 會逐漸溢出,造成培養基越來越偏堿性。而培養基中酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養基偏堿后再用于細胞培養將造成細胞生長停滯或死亡。培養基偏堿時,可以通入無菌過濾的CO2,以調整pH值。
6.無血清培養與有血清培養使用的抗生素量一樣嗎?
    答:當在無血清培養基中添加抗生素時,降低至少在有血清培養基中所使用濃度的50%。因為血清中的蛋白會結合和滅活一些抗生素。而在無血清培養條件下,抗生素不被滅活。
7.培養基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
    答:一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
8.什么是個性化培養基?它有什么優點?
    答:根據細胞類型、培養方式和生產工藝等特點所定制的培養基,即個性化培養基。個性化培養基在國外生物制藥企業被普遍采用,個性化培養基可以為細胞生長提供充足的營養物質,能提高細胞的生長速率、培養密度、以及延長細胞維持時間;也可以為細胞生長提供均衡的營養供給,減少細胞有害代謝物質的積累,降低對細胞生長的危害;同時對貼壁細胞而言,能增加細胞的貼壁性,并降低培養過程中剪切力對細胞的損傷;個性化培養基可以根據各戶的特殊需求減少或不使用動物源成分,從而使生物制品安全性更有保障。
9.細胞培養基偶然被凍,可否繼續使用?
    答:如果細胞培養基偶然被凍,您應該自然溶解培養基并觀察是否有沉淀產生。如果沒有沉淀產生,培養基可以正常使用,如果出現沉淀,只能丟棄這些培養基。
10.細胞冷凍培養基之成份為何?
    答:動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養基是含5 - 10%DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95%原來細胞生長用的新鮮培養基均勻混合。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成。
11.培養基及其它添加物和試劑可反復凍融嗎?
    答:大部分添加物和試劑最多可以凍融3次,如果次數過多會將使含有的蛋發生降解和沉淀,這將會影響它的性能。
12.液體培養基的保存是冷藏好?還是冷凍好?
    答:要冷藏!!通常液體培養基在冷藏條件下可存放6個月到一年。

Hs578T人乳腺癌細胞
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養觀察。同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基,培養觀察
3.若出現生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養基進行培養

貼壁細胞常規培養傳代流程(請嚴格遵照無菌操作
1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存

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